(一)制作临时装片并观察
1、制片
①、用拇指和食指夹住载玻片,然后取三层纱布沿一个方向擦拭载破片,直到对光看到载玻片光亮无污物为止。
②、在载玻片上滴一滴水。(注意胶头滴管的正确使用方法:①握持方法是用中指和无名指夹住玻璃管部分以保持稳定,用拇指和食指挤压胶头以控制试剂的吸入或滴加量。②不能倒置,也不能平放于桌面上。③胶头滴管加液时,不能伸入容器)
③、A、洋葱:选用紫色特别深的洋葱外表皮,用刀片划“井”字,用镊子轻轻撕取中间的小正方形。(注意在洋葱未经过处理时一定要取外表皮)
由于每种材料主要只在取材上有区别,其它步骤基本类似。下面老师演示一种洋葱鳞片叶外表皮装片。
④、将撕取的洋葱鳞片叶外表皮借助解剖针放在水滴中展平,主要是为了细胞尽量无重叠。
⑤、用镊子夹住盖玻片盖在载玻片上(同学们注意:盖盖玻片应让盖玻片的一侧以大约45·先触及载玻片,然后轻轻放平,防止装片产生气泡)如果四周水过多可以用滤纸吸一下。
2、观察洋葱细胞
显微镜使用顺序:取镜—安放—对光(无载破片)打开光源—低倍镜对准通光孔—聚光器调到最高—调节反光镜—把宏光光圈打开(如果还不够亮可以稍微动一下粗准焦螺旋)—放装片—先用低倍镜调粗准焦螺旋至物像清晰,并调至中央,后扭转物镜转换器用高倍镜观察
可以看到洋葱鳞片叶表皮细胞中紫色的中央液泡,还可以看到原生质层紧贴着细胞壁。
(二)、观察质壁分离及复原
1、观察质壁分离现象
①取下载玻片(如果不取下,在载物台上滴加蔗糖会一不小心滴漏在显微镜上,会损坏显微镜)
②从显微镜上取下装片,放在实验桌上。从盖玻片的一侧滴入0.3g/mL的蔗糖溶液,在盖玻片的另一侧用吸水纸吸引,重复几次,为什么要重复呢?让盖玻片下面的洋葱鳞片叶完全侵润在蔗糖溶液中。
③高倍镜观察表皮细胞发生的变化。
中央液泡变小,原生质层脱离细胞壁
2、观察细胞质壁分离的复原现象
①取下载玻片(如果不取下,在载物台上滴加清水会一不小心滴漏在显微镜上,会损坏显微镜)
②从显微镜上取下装片,放在实验桌上。从盖玻片的一侧滴入清水,在盖玻片另一侧用吸水纸吸引,这样重复几次。洋葱鳞片叶表皮浸润在清水中。
③用高倍显微镜观察,可以看到中央液泡逐渐胀大,原生质层又逐渐贴向细胞壁。
实验结束后记得用纱布把显微镜擦干净放回原处,其他用具也清洗干净放回原处,下面3人一组,每组必须两种材料各做一个装片,三位老师各负责一个大组的指导工作。
3、画出所观察到的图形并用表格记录现象。
4、用紫鸭跖草检测0.1g/mL、0.3g/mL、0.6g/mL的蔗糖溶液。
五、注意事项:
1、 要节约实验材料,可以将洋葱鳞片叶切成小块分给学生。
2、 在撕取洋葱鳞片表皮时,要注意不要让表皮细胞中的液泡破损,否则影响实验结果,判断液泡是否破损的依据是:完整的、液泡未破的洋葱鳞片叶表皮是紫红色的,而破损的则是无色半透明的。
3、 用显微镜观察时,不能直接用高倍镜,应先在低倍镜下观察,再用高倍镜观察,若低倍镜下看得很清楚,就不必用高倍镜观察了。
4、 不能直接在载物台上滴加蔗糖溶液和清水,必须在实验桌上进行,并且必须重复几次。
5、 使用的外界溶液浓度要适当,浓度过大,质壁分离速度快,但会影响细胞的
6、 注意在洋葱未经过处理时一定要取外表皮
7、 整个过程中,观察细胞一定要保持活性。
板书部分:
四、实验步骤:
(一)制作临时装片并观察
1、制片
擦 滴 取 浸 展 盖
2、观察洋葱细胞
(二)观察质壁分离及复原
1、观察质壁分离现象
滴蔗糖 吸引 观察
2、观察细胞质壁分离的复原现象
滴清水 吸引 观察
3、画出所观察到的图形并用表格记录现象。
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